往年，隨著《化妝品監(jiān)視管理條例》、《化妝品分類規(guī)則和分類目錄》和《化妝品成效宣稱評價規(guī)范》等新法規(guī)的先后公布和實施，對整個行業(yè)的迷信安康、有序開展提出了更高的詳細要求，在產(chǎn)品的平安性、評價要求和成效宣稱方面都制定了相應(yīng)的規(guī)范。

近日，圍繞新法規(guī)下企業(yè)關(guān)心的成效評價方面的效果，博溪生物總經(jīng)理盧永波在由聚美麗主辦的“2021化妝品產(chǎn)學(xué)研醫(yī)技術(shù)論壇”宣布了《新規(guī)下化妝品成效評價與檢測》主題演講，經(jīng)過火享一系列成效評價的案例，并給出相關(guān)處置方案。

這是化妝品成效評價與檢測的一線總結(jié)，在快速開展的市場環(huán)境以及新規(guī)下，不論是啟用3D皮膚模型等實驗室方法，還是運用分子生物學(xué)的方法，在這套技術(shù)體系里對行業(yè)規(guī)范或許企業(yè)都有自創(chuàng)意義。

本文是此次演講的局部精髓內(nèi)容，經(jīng)盧永波自己審核。

我們不時從事皮膚3D模型和相關(guān)測試工具的開發(fā)，同時，也樹立了一系列用于化妝品平安和成效測試的方法體系。基于閱歷，再結(jié)合近一兩年的監(jiān)管趨向，我明天借聚美麗的平臺，和大家做下交流。

關(guān)于新規(guī)的公布，站在我們的角度來看，至少會惹起三方面的革新。首先，要求企業(yè)產(chǎn)品宣稱契合法規(guī)的基礎(chǔ)要求;其次，在產(chǎn)品設(shè)計尋求差異化時如何研收回更好的產(chǎn)品會成為全行業(yè)的思索;另外，宣稱上，要求企業(yè)樹立更好更高效的消費者和產(chǎn)品交互的言語。

而在做第三方成效評價的時分，需關(guān)注這四個基本的準(zhǔn)繩——迷信性、真實性、牢靠性、可追溯性。企業(yè)自己評價項目也要契合這樣基本的要求。另外，還要樹立一個規(guī)范的實驗室，對報告的真實性停止擔(dān)任。

未來幾年，無論是實驗室方法，還是人體方法，尤其是在規(guī)范樹立的大背景下，會推停止業(yè)的規(guī)范和提高。

實驗室方法在化妝品成效評價中的運用：三層級、4M準(zhǔn)繩

內(nèi)行業(yè)里我們都有哪些可選擇的成效評價方法?

首先要強調(diào)的是，我覺得一個迷信的化妝品成效評價一定是多維度的。

目前行業(yè)里主要有三個層級。*個層級，細胞分子的相關(guān)目的。比如說做一個抗氧化的，需測一個ROS目的，而做一個抗皺的，可以做一個IV型膠原蛋白目的等，這就是一個單分子目的的檢測體系。

這里需求留意的是這個目的測試的結(jié)果與人體*終的成效差異多大是不確定的，這也是我們?yōu)槭裁垂奈枳龆鄬蛹墧?shù)據(jù)的緣由之一。

第二個層級，運用離體的組織，3D皮膚模型等，主要在組織維度的工具和方法上。基于這樣的體系，我們可以在形狀學(xué)上到達一站式的檢測，這樣可以把分子層面到真實的人體層面有更好的過渡。

第三個層級，在一些成效宣稱的方向上，提取一些人體方面的數(shù)據(jù)支撐。

另外，在全體的實驗室技術(shù)體系引見里，它需契合四個M的準(zhǔn)繩，區(qū)分是機制 Mechanism、目的 Markers、模型 Models與方法 Methods。

機制 Mechanism：樹立皮膚成效形狀面前的細胞分子機制，由于我們做任何成效方向的評價、研討或許活性物選擇都脫離不開對特定成效方向機理上的研討。

目的 Markers：從不同皮膚形狀的發(fā)生機制失掉對應(yīng)的檢測目的，用于反映皮膚成效的變化。

在機理研討層面上，會描寫出更易于檢測和實施的靶標(biāo)，這些都是在方法學(xué)里十分關(guān)注的目的。在這個目的之下，我們需選擇適宜的模型。

模型 Models：依據(jù)皮膚形狀發(fā)生的機理，同時結(jié)合體外現(xiàn)有的基礎(chǔ)模型挑選*的造模條件。

那么模型選擇的依據(jù)是什么?首先模型Models要具有生理才干，第二模型需與評價對象的配伍和兼容。

方法 Methods：關(guān)于挑選的檢測目的，在組織、細胞、蛋白、基因等不同水平選擇對應(yīng)的檢測方法開發(fā)與驗證。

我們會經(jīng)過一些現(xiàn)代分子生物學(xué)的方法，以及理化的方法Methods，對它停止測定，全體上構(gòu)成評價技術(shù)的基本體系。

體外方法在化妝品成效評價上的運用及案例

我們曾接觸到一家企業(yè)，他們有上百個特證產(chǎn)品，但是從未做過人體成效測試。這意味，他們產(chǎn)品賣了一兩年緩沖期之后便下架，面臨著重新開發(fā)新產(chǎn)品。但是我們知道法規(guī)規(guī)則的特證產(chǎn)品都是需求停止人體測試的，且行業(yè)那么大，產(chǎn)品這么多，有多少的比例是屬于概念性添加?

提到人體測試時，不少人對此沒決計。那么，在正式人體實驗之前，有沒有相關(guān)數(shù)據(jù)庫能先幫大家停止剖析等?接上去，我講一下——體外方法在化妝品成效評價上的運用及案例。

1、美白成效

有些公司有一定開發(fā)技術(shù)基礎(chǔ)如美白劑(具有一定的美白成效)等，如何停止體外的預(yù)篩，然后停止人體測試。

我們把產(chǎn)品涂抹在3D黑素皮膚模型的外表，經(jīng)過一系列的目的，可以直觀看到產(chǎn)品運用后皮膚模型表觀顏色究竟是白還是黑了。另外也可以測定表觀亮度L值，黑素的散布和含量等相關(guān)目的。

我們來看一個詳細的案例，雅詩蘭黛專研光透煥白精髓素。

我們可以看到色度，在UVB組的照射下，抹了該產(chǎn)品之后，色度清楚比對照組要淡一些，這是十分直觀的美白效果，其他的量化目的也能證明這點。右下角的組織學(xué)里出現(xiàn)的黑素散布形狀，其結(jié)果不只可以通知我們這個產(chǎn)品的原理究竟是抑制黑素分解，還是抑制黑素的轉(zhuǎn)運;同時可得知，假設(shè)組織學(xué)結(jié)構(gòu)十分完整的話，這個產(chǎn)品的平和性很高。這是我們在美白上的運用。

2、防脫成效

關(guān)于防脫產(chǎn)品的成效，行業(yè)的決計度是很低的，行業(yè)里也缺乏真正有效的防脫自然活性原料。只能尋覓更多自然或許中藥的提取物來處置這個效果，但是有一些原料雖有一定的成效，但是成效表現(xiàn)不夠冷艷。

從防脫機理來說，有三點。*5α恢復(fù)酶抑制劑;第二毛乳頭生臨時經(jīng)過營養(yǎng)液調(diào)理;第三讓休止期的毛發(fā)重新進入生臨時。

另外從評價技術(shù)來看，可以與醫(yī)院協(xié)作——提取離體的毛囊，然后經(jīng)過離體的毛囊，測生長毛囊的大小，還包括毛乳頭一些凋亡的狀況等。經(jīng)過直觀的形狀學(xué)，再結(jié)合一些相關(guān)的因子表達，可以綜合地剖析待測的物質(zhì)有沒有防脫成效。

當(dāng)然還可以做更深層次的研討，比如H2O2-毛乳頭細胞(DPC)、DHT-毛乳頭細胞(DPC)，可以檢測到不同細化目的的毛乳頭細胞的表現(xiàn)狀況，這一體系不做詳細引見了。

回到防脫產(chǎn)品的開發(fā)狀況，我覺得*主要需求找到一個切入點。究竟是在生臨時處置營養(yǎng)性的、因子性的效果，還是休止期處置毛囊干細胞重新激活的效果，這是*步。

然后我們關(guān)于一個未知的提取物需結(jié)合網(wǎng)絡(luò)藥理剖析，一方面剖析這個原料物質(zhì)能夠存在的靶向基因;另一方面是對標(biāo)的疾病，包括防脫，以及面前調(diào)控的相關(guān)基因。如左邊這個圖，其實前端的任務(wù)，至少整合了雙邊幾千個基因做少量數(shù)據(jù)剖析。

如今來看一下詳細產(chǎn)品案例，是一個某烏發(fā)作發(fā)液。中心點主要是TGF-beta，AR，Wnt，PI3K-AKT這四個通路上。這里有一點要說明，假設(shè)有一個未知的物質(zhì)，它的富集跟脫發(fā)相關(guān)，或許是抑制脫發(fā)相關(guān)的通路越多，它就更有能夠在真正的產(chǎn)品端起到防脫的成效。剖析完后，接上去可以做更多的延展性、細化的任務(wù)，這點是特別需求更多資源的投入。

這里有一個復(fù)雜的離體毛囊的培育，區(qū)分有四個組別，可以直觀看到在不同組別里毛發(fā)的生長的效果。另外也可在毛乳頭區(qū)域，看到它凋亡的狀況，像這個白色箭頭指示區(qū)域，過幾天這個毛發(fā)就會脫掉，如把這個現(xiàn)象抑制住，將會是一份十分直觀的檢測防脫成效的效果圖證明。

我們在直觀檢驗完之后，再配套產(chǎn)品的開發(fā)，從不同的通路停止包裝，以提升我們產(chǎn)品科技的屬性。

3、屏障修復(fù)

第三個案例，我想分享的是屏障修復(fù)和抗炎，也叫免疫調(diào)控。

從評價角度來看，有兩個中心的，一個是免疫調(diào)控，是治標(biāo)的效果;一個是屏障修護，如何自動增強皮膚表層屏障，以及磚墻結(jié)構(gòu)的恢復(fù)功用。

目前，我們匯總的活性物和產(chǎn)品，大致從機理上剖析，有三條主要的通路。*條是撫慰性反響，第二條是過敏性反響。中國無論是撫慰現(xiàn)象還是神經(jīng)性招致的過敏現(xiàn)象，都會叫過敏，但臨床上，真正的過敏現(xiàn)象比例是較低的。第三是神經(jīng)性的敏感。*近比擬火的像CBD，包括神經(jīng)肽類，抑制神經(jīng)遞質(zhì)分泌的都是屬于這個類別。

所以從免疫調(diào)理角度來講，所觸及到的目的，都可以從原料和評價剖析作為切入點。

另外一個，屏障修復(fù)。假設(shè)我們對皮膚的分化結(jié)構(gòu)停止細致剖析的話，屏障相關(guān)目的其實十分多，尤其EDC復(fù)合體，大約有65個基因左右，跟皮膚的屏障結(jié)構(gòu)高度相關(guān)。此外，還有一些銜接蛋白、骨架蛋白/KIFs等。所以我們在這里所提取的目的，就不單單是可以作為我們原料的包裝點，也可以作為它的一個評價點。

舉個例子，這是基于3D的皮膚模型做的染色的結(jié)果。我們可以看到，在不同的處置方式之下，F(xiàn)LG、LOR，都會表現(xiàn)出不同的表達豐度，尤其在NC對照下，這個FLG、LOR表達就會有一個清楚下降。

還有前一段時間檢測的雪果精髓，經(jīng)過SLS撫慰表皮模型發(fā)現(xiàn)：撫慰后表皮形狀會退步，同時分泌出一系列的炎癥因子，我們可以直觀地看見產(chǎn)品看對炎癥因子能否起到抑制造用，以及從免疫調(diào)控的角度來看產(chǎn)品的成效。

第二個方面，是FLG、LOR的CE屏障高度相關(guān)的蛋白質(zhì)。可以看到陰性對照組，這個蛋白含量是降低的。加了這個產(chǎn)品之后，和陰性對照組比，有一個清楚性的提升。經(jīng)過這樣的細分目的可以說明這個產(chǎn)品具有屏障自動修復(fù)的成效，而且和臨床的正常皮膚屏障自動修復(fù)的相關(guān)性也是比擬高的。

4、抗衰老

在抗皺方面，主要觸及到三個主要工具，成纖維細胞、體外重組全層皮膚模型、離體皮膚組織。其中離體皮膚組織，化妝品可以在表皮上直接停止涂抹，這樣可觀察它全體的皮膚變化。

但這個技術(shù)體系有個難點，主要是臨時培育。這個產(chǎn)品在相對長的時間里，看它對皮膚究竟發(fā)生什么樣的變化。首先我們要優(yōu)先保證離體皮膚在體外可以維持兩周以上的生長培育，但正常的細胞三天便片面地凋亡。

結(jié)合現(xiàn)有豐厚的相關(guān)目的、檢測模型，可以挑選用哪個活性物作為我們的配方。

首先需做個初篩，這個初篩主要基于一些高性價比細胞模型，經(jīng)過這個目的可以看到MMP和ROS抑制效果比擬好，然后停止組合。

另外一些可視化的結(jié)果，像膠原的分泌，可以協(xié)助我們確定特定的原料以及它的成效。詳細到產(chǎn)品，我們也會用到相關(guān)相似的方法，像剛才提到的ROS、MMP、COL1，還有一些更重要的，我們會用三維的效果，來看它在組織形狀上有什么綜合的表現(xiàn)。

這是我們前一段時間接觸的含視黃醇類的抗皺修復(fù)產(chǎn)品。這個產(chǎn)品經(jīng)過組織學(xué)比擬，與陰性對照組對比，可看到實驗組表皮層增厚，這跟視黃醇的一些基礎(chǔ)功用相關(guān)。第二看結(jié)構(gòu)，比如I型膠原蛋白，表達豐度有沒有提高。我們知道在衰老皮膚中，DEJ結(jié)構(gòu)退步比擬嚴(yán)重的。

異樣我們也可在膠原纖維的染色密度上作比擬，左邊這個膠原散布密度圖，遠遠高于陰性對照組，還可在彈性纖維表達散布上停止相關(guān)的檢測。這樣的檢測結(jié)果更有利佐證產(chǎn)品在抗皺上的成效，同時也可以作為與其它產(chǎn)品差異化的成效包裝。

說到差異化，行業(yè)里普遍用美白、保濕、控油等統(tǒng)稱，所以我們應(yīng)該思索如何停止更好的差異化宣稱。首先差異化的宣稱，它是為一級宣稱效勞的，我們可以衍生出更好的市場故事。比如修護，可用水潤修復(fù);其次把水潤的相關(guān)目的停止迷信的關(guān)聯(lián)。第三把配方原料里的目的停止檢測。這樣一個逐層的邏輯，做到詳細的實測目的，然后再倒推，經(jīng)過這樣的證據(jù)數(shù)據(jù)支持，來驗證水潤修復(fù)效果。

所以整集體系對皮膚分子機制的驗證，細胞的靶向，包括婚配的原料和產(chǎn)品，是一個系統(tǒng)化的工程，這樣可以到達差異化宣稱的目的。

從全體下去看，化妝品成效的評價、成效產(chǎn)品的開發(fā)，都是從皮膚的生物學(xué)目的末尾的。

我覺得這是一個新的時代，對我們做技術(shù)的人員來講，是十分好的鼓舞。而這個生物目的，中間需求多維度的成效評價方法停止銜接，目前沒有一個獨立的成效評價方法來處置所遇到的效果。

忠于消費者的體驗，把消費者的價值*化。雖然這外面觸及到方方面面的迷信，但我置信把全行業(yè)整合起來，可以帶來龐大的提高。

博 溪生物不時在一線，專注于系列3D皮膚模型開發(fā)和產(chǎn)業(yè)化，專業(yè)聚焦于化妝品、口腔護理、發(fā)用品以及嬰幼兒護理等產(chǎn)品的平安與成效評價，十分快樂無時機和大家分享我們的閱歷，謝謝大家。