一、范圍

本規(guī)范規(guī)則了植物急性眼撫慰性或腐蝕性實驗的基本準繩、要求和方法。

本規(guī)范適用于化妝品原料及其產(chǎn)品平安性毒理學檢測。

二、實驗目的

確定和評價化妝品原料及其產(chǎn)品對哺乳植物的眼睛能否有撫慰作用或腐蝕作用及其水平。

三、實驗的基本準繩

受試物以一次劑量滴入每只實驗植物的一側眼睛結膜囊內(nèi)，以未作處置的另一側眼睛作為自身對照。在規(guī)則的時間距離內(nèi)，觀察對植物眼睛的撫慰和腐蝕作用水平并評分，以此評價受試物對眼睛的撫慰作用。觀察期限應能足以評價撫慰效應的可逆性或不可逆性。植物假設在實驗的任何階段出現(xiàn)嚴重抑郁、痛苦的表現(xiàn)，則應該給予人道地處死，依據(jù)實驗狀況對受試物停止適當評價。植物如出現(xiàn)角膜穿孔、角膜潰瘍、角膜4分超越48h、缺乏光反射超越72h、結膜潰瘍、壞疽、腐朽等狀況，通常為不可逆損傷的癥狀，也應該給予人道地處死。

四、實驗方法

1、受試物：液體受試物普通不需稀釋，可直接運用原液，染毒量為0.1mL。若受試物為固體或顆粒狀，應將其研磨成細粉狀，染毒量應為體積0.1mL 或重量不大于100mg（染毒量應停止記載）。受試物為強酸或強堿（pH 值≤2 或≥11.5），或已證明對皮膚有腐蝕性或強撫慰性時，可以不再停止眼撫慰性實驗。氣溶膠產(chǎn)品需噴至容器中，搜集其液體再運用。

2、實驗步驟：

悄然拉開家兔一側眼睛的下眼瞼，將受試物0.1mL（100mg）滴入（或涂入）結膜囊中，使上、下眼瞼主動閉合1s，以防止受試物喪失。另一側眼睛不處置作自身對照。滴入受試物后24h內(nèi)不沖洗眼睛。若以為必要，在24h 時可停止沖洗。

若上述實驗結果顯示受試物有撫慰性，需另選用3只家兔停止沖洗效果實驗，即給家兔眼滴入受試物后30s，用足量、流速較快但又不會惹起植物眼損傷的水流沖洗至少30s。

臨床反省和評分：在滴入受試物后1、24、48、72h 以落第4d 和第7d 對植物眼睛停止反省。假設72h未出現(xiàn)撫慰反響，即可終止實驗。假設發(fā)現(xiàn)累及角膜或有其它眼撫慰作用，7d內(nèi)不恢復者，為確定該損害的可逆性或不可逆性需延伸觀察時間，普通不超越21d，并提供第7d、14d、21d的觀察報告。除了對角膜、虹膜、結膜停止觀察外，其它損害效應均應當記載并報告。可運用縮小鏡、手持裂隙燈、生物顯微鏡或其它適用的儀器設備停止眼撫慰反響反省。在24h觀察和記載完畢之后，對一切植物的眼睛運用熒光素鈉作進一步反省。

對用后沖洗的產(chǎn)品（如洗面奶、發(fā)用品、育發(fā)沖洗類等）只做30s沖洗實驗，即滴入受試物后，眼閉合1s，至第30s時用足量、流速較快但又不會惹起植物眼損傷的水流沖洗30s，然后停止反省和評分。

對染發(fā)劑類產(chǎn)品，只做4s 沖洗實驗，即滴入受試物后，眼閉合1s，至第4s時用足量、流速較快但又不會惹起植物眼損傷的水流沖洗30s，然后停止反省和評分。

五、結果評價

每只植物在每一觀察時點（如染毒1，24，48 和72h）的撫慰反響（建議的表格方式），將實驗條件不沖洗和30秒沖洗或4秒沖洗的結果區(qū)分列表；化妝品原料——以給受試物后植物角膜、虹膜或結膜各自在24、48和72h觀察時點的撫慰反響積分的均值和恢復時間評價，按眼撫慰反響分級判定受試物對眼的撫慰強度。

六、實驗結果的解釋

急性眼撫慰性實驗結果從植物外推到人的牢靠性很有限。白色家兔在大少數(shù)狀況下對有撫慰性或腐蝕性的物質(zhì)較人類敏感。若用其它品系植物停止實驗時也失掉相似結果，則會添加從植物外推到人的牢靠性。

來源：檢測效勞

化妝品檢測范圍

清潔類化妝品：洗面奶、卸妝水（乳）、清潔霜（蜜）、面膜、花露水、痱子粉、爽身粉、浴液、洗發(fā)液、洗發(fā)膏、剃須膏、洗甲液、唇部卸妝液等。

護理類化妝品：護膚膏霜、乳液、化裝水、護發(fā)素、發(fā)乳、發(fā)油/發(fā)蠟、焗油膏、護甲水（霜）、指甲硬化劑、潤唇膏等。

美容/修飾類化妝品：粉餅、胭脂、眼影、眼線筆（液）、眉筆、香水、古龍水、定型摩絲/ 發(fā)膠、染發(fā)劑、燙發(fā)劑、睫毛液（膏）、生發(fā)劑、脫毛劑、指甲油、唇膏、唇彩、唇線筆等。

檢測目的

微生物目的：菌落總數(shù)、霉菌和酵母計數(shù)、大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、沙門氏菌、銅綠假單胞菌、軍團菌等。

理化目的：總活性物、鉛、砷、汞等重金屬，甲醇、甲醛、黃曲霉毒素、耐寒、耐熱、磷酸鹽、pH、水分含量等。

毒性實驗：鼠傷寒沙門氏菌/細菌回復突變實驗、急性經(jīng)口毒性實驗、急性經(jīng)皮毒性實驗

酶活性檢測：纖維素酶、糖化酶、淀粉酶、蛋白酶、耐熱淀粉酶、超氧化物歧化酶（SOD）等。

平安性檢測：殺菌劑、防腐劑、防霉劑和抗菌劑等。

《化妝品衛(wèi)生規(guī)范2007》

◆重金屬檢測；

◆微生物檢測；

◆防腐劑、性激素、甲醇、甲醛、氫醌、苯酚等有害物質(zhì)檢測；

◆感官檢測；

我國市場外銷售的化妝品，都需求契合相關的產(chǎn)品規(guī)范。世通檢測可依照產(chǎn)品規(guī)范停止測試，產(chǎn)品范圍涵蓋護膚、護發(fā)、沐浴、洗濯等40多個產(chǎn)品規(guī)范。

微生物限制實驗/微生物應戰(zhàn)實驗

出口到歐盟和美國的化妝品必需契合歐盟化妝品指令76/768/EEC和美國聯(lián)邦食品、藥品和化妝品法（FDA）在微生物方面的要求，以保證消費者在正常運用下的安康。

化妝品成分剖析

世通檢測化妝品成分剖析測試中心，是專門停止化妝品成分剖析和測試的科研部門，該中心由多名博士和專業(yè)人員組成，擁有的儀器包括LC-MS/MS、GC-MS、HPLC、SEM、FTIR等。可協(xié)助企業(yè)處置技術難題，改良產(chǎn)品配方，應對法規(guī)壁壘，提升產(chǎn)品的中心競爭力。

化妝品檢測項目

1、慣例項目：甲醛、甲醇、巰基乙酸、氫醌、苯酚、維生素D2、維生素D3、氨基酸。

2、無機檢測：可溶性鋅鹽、硼酸和硼酸鹽、總氟、鍶、鎘、汞、砷、鉛、pH值、游離氫氧化物。

3、微生物：細菌總數(shù)、糞大腸菌群、綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌。

4、性激素：雌三醇、己烯雌酚、雌二醇、睪丸酮、甲基睪丸酮、黃體酮。

5、防曬劑：二苯酮、對氨基苯甲酸、甲氧基肉桂酸乙基己酯、水楊酸乙基己酯。

6、防腐劑：甲基氯異噻唑啉酮、甲基異噻唑啉酮、苯甲醇、苯氧乙醇、苯甲酸，對羥基苯甲酸甲、乙、丙、丁酯。

7、染發(fā)劑中的染料：氨基苯酚、間苯二酚、苯二胺。

8、α-羥基酸：酒石酸、乙醇酸、蘋果酸、乳酸、檸檬酸。

9、去屑劑：水楊酸、酮康唑。

10、抗生素：甲硝唑、二水土霉素、金霉素、土霉素、鹽酸多西環(huán)素、氯霉素、鹽酸四環(huán)素、鹽酸美滿霉素。

11、防曬化妝品UVB區(qū)防曬效果、紫外線吸收劑定性及定量。

13、41種糖皮質(zhì)激素檢測。

14、過敏源物質(zhì)檢測。

一、pH 值的測定

（一）、剖析步驟

1. 按說明書調(diào)理好儀器。

2. 玻璃電極在運用前應放入純水中浸泡 12h 以上。

3. 將酸度計的電極浸入 25℃與樣品溶液相接近的 pH 值規(guī)范緩沖溶液中, 校 正酸度計刻度。

4. 溶液狀樣品可直接取樣測定、膏、霜、粉等固體及半固體樣品按 樣品 加 9ml 純水的比例準確稱取放入 50ml 燒杯中攪拌 5min (必要時可加溫到 40±1℃),使樣品混溶平均 。

5. 測定終了后,將電極沖洗潔凈 ( 10 ) ,其中玻璃電極浸在水中備用。

（二）中華人民共和國有關化妝品 GB、QB、ZBY規(guī)范的pH范圍、測定方法、規(guī)范號資料供參照執(zhí)行。

專業(yè)規(guī)范-（ZBY）

發(fā)用冷燙液-卷發(fā)劑 GB11428-89

發(fā)用冷燙液-走型劑GB11428-89

發(fā)乳 GB11429-89

唇膏 GB11430-89

潤膚乳液GB11431-89

洗發(fā)液 GB11432-89

護發(fā)素 ZBY42003-89

化裝粉餅 ZBY42004-89

染發(fā)水ZBY42005-89

染發(fā)粉ZBY42005-89

（三）、 制備 pH 規(guī)范溶液和樣品的稀釋水應是去離子水, 25℃時電阻率應大于 0.5M·cm,從混合柱去離子器出口直接接取,或煮沸蒸餾水 15min ,冷卻,除 去二氧化碳, pH 升到 6.7 ~ 7.3 的制備水。

（四）、 緩沖溶液運用聚乙烯瓶貯存。商品緩沖溶液經(jīng)臨時貯存雖未啟開運用, 也能夠有變化。由磷酸鹽、硼酸鹽、碳酸鹽制備的中性到堿性 pH 范圍的緩沖溶 液, 對大氣中的二氧化碳特別敏感,所以應留意密封保管。

二、鎘檢測

1、化妝品中鎘的測定原子吸收法 樣品經(jīng)預處置,使鎘以離子形狀存在于溶液中,試液中鎘離子被原子化后, 基態(tài)原子吸收; 來自鎘空心陰極燈的共振線, 其吸收量與樣品中鎘的含量成正比。在其他條件不變的狀況下, 依據(jù)測定被吸收后普賢強度, 與規(guī)范系列比擬, 停止 定量。

2、化妝品中鎘的測定-雙硫腙比色法 在堿性溶液中,鎘離子與雙硫腙發(fā)生白色絡合物,用氯仿提取后比色定量。

3、 化妝品中鉍測定-鉍化合物作為漂白劑和珠光劑添加在化妝品中。亞硝酸鉍是收斂劑, 對皮膚 有漂白作用。日本化妝品衛(wèi)生規(guī)范規(guī)則*允許用量為 3% ,國外資料報導,長 期用含鉍化合物的藥品,對神經(jīng)系統(tǒng)有反作用。測定方法有二甲酚橙定性法,乙二胺四乙酸二鈉( EDTA-2Na )滴定法、原子 吸收分光光度法。

( 一 ) 二甲酚橙定性法

1. 原理 ：鉍離子和二甲酚橙在酸性條件下一步出現(xiàn)紅紫色。

2. 試劑：0.2% 二甲酚橙溶液:稱取二甲酚橙( xylenolorange) 0.1g 溶于 50%乙醇并稀釋 至 50ml 。

3. 剖析步驟 ：稱取樣品約 25 ~ 30mg 置于 25ml 比色管中, 加 15 ％硝酸 lml 于沸水浴中加熱 2min , 加 10ml 水,冷卻后加 2 滴 0.2 ％二甲酚橙指示劑,如有鉍化合物存在,溶液呈 現(xiàn)紅紫色。

( 二 ) 乙二胺四乙酸二鈉滴定法( EDTA-2Na )鉍和硫脲反響生成黃色絡合物,此絡合物不動搖。用 EDTA-2Na 滴定時,絡 合物中的鉻和 EDTA-2Na 反響生成無色絡合物,黃色消逝即為反響終點。

三、 化妝品中汞的測定

化妝品衛(wèi)生規(guī)范中規(guī)則, 汞及汞化合物不可作為化妝品的原料成分， 汞的檢驗方法很多,除已于 1987 年訂為規(guī)范檢驗方法 GB7917.1 一 87 的恢復一氧化的冷原子吸收法外,尚有可以快速定性的碘化亞銅法和高溫熱解 - 金汞齊富集 - 冷原子吸收法等。

( 一 ) 碘化亞銅定性法

1. 運用范圍：本方法適于化妝品中汞的快速定性檢驗。其中快速法( 5.1 )適用于不含煤 焦油色素之化妝品中無機汞鹽的檢測, 如因檢樣所含色素使其呈色難于識別時可 運用 5.2 的萃提法。

2 . 原理：化妝品中的無機汞鹽與碘化亞銅構成白色含汞的碘絡合物 Cu 2 HgI 4

(二)催化 - 富集 - 冷原子吸收法

1. 運用范圍 ：本法適用于化妝品中汞的測定。

2. 原理：樣品在外表活性劑作用下經(jīng)高速散處置, 使油、霜、膏等與水充沛混和并均 分散在制成的樣液中。樣液中的汞在堿性介質(zhì)中和 Cu 2+ 存在下,被氯化亞錫恢復 為汞原子,與攪擾物質(zhì)一同被載氣帶入高溫的鈀催化管,消化去除一切的攪擾物 質(zhì)后,汞由金膜汞富集管捕捉吸收,經(jīng)釋放后用測汞儀測定。

四、植物實驗（依據(jù)《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》）

急性經(jīng)口毒性實驗

急性經(jīng)皮毒性實驗

急性和屢次皮膚撫慰性/腐蝕性實驗

急性眼撫慰/腐蝕性實驗

皮膚過敏/變態(tài)反響實驗

皮膚光毒性實驗

亞慢性經(jīng)皮毒性實驗

五、植物替代實驗（依據(jù)OECD、歐盟和檢驗檢疫行業(yè)規(guī)范）

3T3中性紅吸收光毒性實驗

急性毒性的角質(zhì)細胞實驗

急性毒性的3T3細胞實驗

眼撫慰性/腐蝕性的雞胚尿囊膜實驗

胚胎和發(fā)育毒性的干細胞實驗

六、順應性和成效項目

人體皮膚斑貼實驗（除臭類/防曬類/祛斑類）

防曬化妝品防曬指數(shù)（SPF）測定（人體實驗）

防曬化妝品防曬指數(shù)（SPA）測定（人體實驗）

防曬化妝品防水功用測試（人體實驗）

保濕類化妝品成效評價

抗油脂化妝品成效評價

抗皺化妝品成效評價

美白化妝品成效評價

防脫育發(fā)產(chǎn)品成效評價

七、防曬劑、防腐劑等添加劑含量檢測

普通化妝品中都含有防腐劑，可用于抑制細菌生長繁衍，防止蛻變，但參與量過大亦會對人體發(fā)生撫慰，甚至惹起接觸性皮炎。因此我國化妝品衛(wèi)生規(guī)范對化妝品中防腐劑和防曬劑的種類和運用量均作了限制。

八、甲醛、氫醌、苯酚等有害物質(zhì)檢測

化妝品中的有害物質(zhì)主要來自化妝品的化工原料、添加的禁用和超量運用限用的化學物質(zhì)。

化妝品中添加性激素可促進毛發(fā)作長、消弭皺紋、添加皮膚彈性、防止皮膚老化，但臨時運用含激素的化妝品易招致人體代謝紊亂及癌癥的發(fā)作。

甲醇作為溶劑添加在香水及噴發(fā)膠系列產(chǎn)品中，對中樞神經(jīng)系統(tǒng)具有清楚的麻醉作用，可惹起腦水腫。對視神經(jīng)及視網(wǎng)膜有特殊選擇作用，惹起視神經(jīng)萎縮，招致雙目失明。

氫醌對皮膚有美白作用，普遍用于祛斑漂白類化妝品中，由于其毒性、撫慰性大，輕則招致皮膚瘙癢、過敏、紅斑、灼傷等不良反響。假設大面積臨時運用還將對人體器官、系統(tǒng)發(fā)生毒害作用，并引發(fā)外源性白斑病、褐黃病和白血病、腫瘤和心血管等疾病。

甲醛具有防腐、殺菌消毒成效，普遍運用于化妝品中。皮膚直接接觸甲醛可惹起過敏性皮炎、色斑、壞死，吸入高濃度甲醛時可誘發(fā)支氣管哮喘。